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MOPC小鼠少突胶质前体细胞培养指南 - 尊龙凯时人生就博品牌推荐

发布时间:2025-02-07   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时人生就博提供的MOPC小鼠少突胶质前体细胞培养说明书详细列出了细胞培养的基本要求和步骤,确保研究人员能够高效安全地进行细胞培养和管理。

MOPC小鼠少突胶质前体细胞培养指南 - 尊龙凯时人生就博品牌推荐

一、细胞培养条件

细胞名称:MOPC小鼠少突胶质前体细胞
生长特性:贴壁生长
冻存条件:无血清冻存液(货号:C7001)
培养体系:DMEM+10%FBS+1%双抗
传代方法:建议在首次传代时采用1:2比例。请注意每两天更换培养基。

如对比培养结果不理想,建议直接购买尊龙凯时人生就博提供的完全培养基进行培养。

二、细胞收到后处理

在收到细胞后的处理过程中,应尽快将细胞培养至良好状态,灌满完全培养液并密封瓶口,以保证细胞在运输过程中的稳定性。接收到细胞后,使用75%酒精对细胞瓶进行消毒,放在超净台内严格操作。建议将细胞瓶放入37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时,以恢复细胞状态。

使用显微镜观察细胞生长,并建议拍摄不同倍数的照片(如40x, 100x, 200x各一张)以备售后参考。前三天的照片尤为重要,如果未提供照片,则默认为收到的细胞状态良好。

三、细胞培养步骤

a. 细胞传代

当细胞汇合度未超过80%时,收集培养液并保留5ml培养基,继续在37℃、5% CO2的环境中培养;当细胞密度超过80%时,开始传代。具体步骤如下:

  1. 弃去培养上清,使用不含钙、镁离子的PBS洗涤细胞1-2次。
  2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,观察细胞状态,若多数细胞脱落,立即加入5ml完全培养基终止消化。
  3. 将细胞悬液轻轻吹打以确保细胞完全脱落,并转移至离心管中,1000RPM离心5分钟,弃去上清并用1-2ml完全培养基重悬。
  4. 将细胞悬液以1:2的比例分瓶(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。

b. 细胞冻存

  1. 当细胞覆盖培养瓶80%面积时,弃去培养液,用PBS清洗。
  2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml,待细胞回缩后加入5ml完全培养液终止消化,轻轻吹打以脱落细胞,并转移至离心管,1000RPM离心5分钟。
  3. 弃去上清,加入1ml无血清冻存液(货号:C7001),混匀后转入冻存管中。
  4. 将冻存细胞放入-80℃冰箱,如需转移到液氮罐,需在-80℃冰箱中存放24小时以上再转入液氮。

c. 细胞复苏

  1. 从液氮中取出冻存管,快速放入37℃水浴中解冻,待无结晶后用75%酒精擦拭外壁。
  2. 将冻存管中细胞移至含5ml完全培养基的离心管中,1000RPM离心5分钟。
  3. 弃去上清,用5ml完全培养基重悬细胞,接种至T25培养瓶,放置于37℃、5% CO2的培养箱中。
  4. 次日更换为新鲜完全培养基继续培养。

四、注意事项

在运输过程中,细胞脱落是正常现象,如细胞数量较少,可将培养液收集至离心管进行处理。处理方式与传代步骤相同,务必确保细胞状态的良好。

五、售后条款

尊龙凯时人生就博对细胞的售后服务明确列出以下条款,如发生以下情况可重新发送细胞:

  1. 细胞在运输过程中发生丢失、瓶身破损或严重漏液。
  2. 收到后48小时内提供的真实实验结果显示细胞污染。
  3. 在指定时间内提供清晰的细胞状态照片,证明细胞存活率低。
  4. 如在运输后合格的情况下,细胞出现污染情况可重发。
  5. 对于细胞活力问题,需要在收到产品7天内反馈。

如有其他问题,请及时与我们客服联系,尊龙凯时人生就博将竭诚为您服务。