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肽核酸(PNA)序列设计指南:尊龙凯时人生就博带你探索生物医疗新领域

发布时间:2025-02-14   信息来源:尊龙凯时官方编辑

具体设计规则

长度:合成的PNA序列通常不超过18个碱基,接头、氨基酸和标记物不计入此限。

肽核酸(PNA)序列设计指南:尊龙凯时人生就博带你探索生物医疗新领域

含有氨基酸:在序列的N端或C端可以添加一个赖氨酸或半胱氨酸。

嘌呤含量:富含嘌呤的PNA易发生聚合反应,并且水溶性差。为避免聚合反应,请遵循以下原则:将嘌呤含量限制在60%以下。例如,序列GATTAGCAGTCTACG是可行的(嘌呤含量<60%),而连续嘌呤应不超过4个,鸟嘌呤不超过3个。例如,ATTAGGGGCATCTAC(不可行,连续4个G)和CTAGATAGAAGGTTC(不可行,连续6个嘌呤)。如无法避免这些规则,可考虑使用探针的互补链。例如,GTAGATGCCCCTAAT(可行,上述序列的互补序列)和GAACCTTCTATCTAG(可行,上述序列的互补序列)。

避免自我互补序列:如反向重复、发夹和回文序列。由于PNA/PNA相互作用强于PNA/DNA,这类探针容易发生聚合。四个碱基互补是可行的,但仅限于除含C和G的情况外。当它们之间有一个或多个碱基间隔时也可行。例如,GATAATTGCA(可行,四个碱基互补),而GATCCGGTAC(不可行,只有CCGG互补),TATCCTGGTA(可行,CC与GG之间有一个碱基)。

六个及以上碱基的互补是不被允许的。例如,CTATTAATGCA(不可行,6个碱基互补)。但当间隔为一个或多个碱基时,六个碱基互补可行,除非只包含C和G。例如,AGTGCTACT(可行,有间隔)。至于GCGGCTCGC(不可行,仅G和C互补),即使有间隔,八个碱基互补也是不可行的。例如,ACTGTCAGT(不可行,8个碱基互补)。

一般规则

我们强烈建议设计反向平行的PNA探针。PNA可以向任一方向形成双链,但反向平行取向更为优先,形成常见的双链构造。在反义和DNA探针类型的应用中,反向平行是最优先考虑的构型。当取向为反向平行时,PNA探针的N端对应DNA的5’端。

值得注意的是,PNA的熔点与DNA不同。由于PNA链是不带电的,PNA-DNA的Tm值通常高于对应的DNA-DNA。一般来说,在100mM NaCl条件下,每增加一个碱基,其Tm值会提高约1°C。在低盐浓度的环境下,Tm值差异更加明显。通常情况下,含10个碱基的PNA,其Tm值约为50°C,而含15个碱基的PNA Tm值约为70°C。最佳的PNA序列长度为12至17个碱基。序列长度主要依赖于具体的应用,与DNA应用相比,PNA探针所需的长度更短。根据序列,较长的PNA链容易聚合,不易进行纯化和表征,然而短序列具有更强的特异性,因此对于短序列而言,匹配失误的影响更显著。

订单信息

PNA的报价依赖于序列长度、产量、纯度及修饰标记,您可将具体需求发送给我们,尊龙凯时人生就博将及时与您联系。最低订购量为:未标记PNA 20 nmole,标记PNA 10 nmole。可选择90%和95%的纯度,并提供HPLC纯度分析及质谱分析报告。一般而言,交货时间为2到3周,若为gamma PNA或修饰标记则需要3到4周。

精选引用

如需了解使用我们的PNA所发表的研究文献,可参考以下文献:- **Exponential Increase in an Ionic Signal: A Dominant Role of the Space Charge Effect on the Outer Surface of Nanochannels**,Anal Chem | 28 Sep 2021,所有单链PNA序列均由SBS Genetech Co, Ltd(北京,中国)购买。- **Peptide Nucleic Acid-Functionalized Nanochannel Biosensor for the Highly Sensitive Detection of Tumor Exosomal MicroRNA**,Anal Chem | 30 July 2021,PNA由SBS Genetech Co Ltd(北京,中国)合成,Table S1显示了上述提到的寡核苷酸序列。- **Ultrasensitive Exosomal MicroRNA Detection with a Supercharged DNA Framework Nanolabel**,Anal Chem | 2 April 2021,5'端含有−(CH2)6−间隔的硫醇化PNA由SBS Genetech Co, Ltd(北京,中国)合成和纯化,所有这些序列见Table S1。